期刊简介
本刊于1995年创刊，主要报道预防医学领域的科研成果、先进方法和经验总结等。已被15家国内外著名的检索性期刊和数据库收录，受到读者和同行专家的好评。
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- 杂志名称：应用预防医学杂志
- 主管单位：广西壮族自治区卫生厅
- 主办单位：广西壮族自治区疾病预防控制中心
- 国际刊号：1673-758X
- 国内刊号：45-1345/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：广西优秀科技期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
两种巢式PCR法检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的灵敏度评价
杨芳芳；张小娟；王鸽；欧阳颐；林睿；黎学铭
关键词：卡氏肺孢子虫, 线粒体核糖体大亚基RNA, 基因(mtLSU), 内转录间隔区(ITS), 5.8S, 核糖体RNA, 基因(5.8Sr, RNA)巢式PCR
摘要：目的 对ITS1-5.8S rRNA-ITS2 巢式PCR 法与mtLSUrRNA 巢式PCR 法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性进行评价.方法 把大鼠随机分为7 组(6 组实验组,1 组对照组),每组10 只,采用地塞米松免疫抑制法诱导实验组大鼠感染肺孢子虫;自第3 周开始每周剖杀1 组实验鼠,收集第3 周至第8 周实验组大鼠肺组织(LT,lung tissue) 和支气管肺泡灌洗液(BALF,bronchoalveolar lavage fluid) 标本.同时采用镜检法、ITS1-5.8S rRNA-ITS2 巢式PCR 法和mtLSUrRNA 巢式PCR 法对大鼠LT 和BALF 标本进行检测,并对结果 进行统计学分析.结果 采用GMS 染色镜检法于第5 周开始检出肺孢子虫包囊,第6、7 周包囊数多.采用ITS1-5.8S rRNA-ITS2-巢式PCR 法和mtLSUrRNA 巢式PCR 法对实验感染大鼠LT 和BALF 进行检测,前者卡氏肺孢子虫阳性率分别为第3 周20% (2/10)和0(0/10);第4 周70%(7/10)和10%(1/10);第5 周90%(9/10)和30%(3/10);第6 周90%(9/10)和80%(8/10);第7 周100%(10/10)和80%(8/10);第8 周40%(5/8)和40%(5/8).后者卡氏肺孢子虫阳性率分别为第3 周100% (10/10)和100(10/10);第4 周100%(10/10)和80%(8/10);第5 周100%(10/10)和50%(5/10);第6 周90%(9/10)和100%(10/10);第7 周100%(10/10)和80%(8/10);第8 周100%(8/8)和87.5%(7/8).经χ2检验,在大鼠无明显症状阶段(3~4w)时,两种巢式PCR 方法 检测敏感性差异有统计学意义.有明显症状阶段(5~8wq)时,其敏感性差异无统计学意义;同时统计学分析显示不同来源的标本对不同方法 敏感性不同,采用mt-LSU 巢式PCR 检测时,LT和BALF标本敏感性差异无统计学意义,采用ITS-巢式PCR检测时,对LT检测的敏感性更高.结论 mtLSU-巢式PCR 法检测实验大鼠中检出卡氏肺孢子虫敏感性高于ITS1-5.8S rRNA-ITS2-巢式PCR 法.
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